No evidence of amplified Plasmodium falciparum plasmepsin II gene copy number in an area with artemisinin-resistant malaria along the China-Myanmar border

中国疾病预防控制中心寄生虫病所黄芳PI团队近期在《Malaria Journal》发表了题为“No evidence of amplified Plasmodium falciparum plasmepsin II gene copy number in an area with artemisinin-resistant malaria along the China-Myanmar border”的专著文章。恶性疟原虫青蒿素耐药性的出现和扩散对全球疟疾消除已构成威胁。近年来，在柬埔寨出现了哌喹（PPQ）耐药性，该药物作为在中国广泛使用的复方药物双氢青蒿素哌喹（DHA-PPQ）的重要配伍药物。恶性疟原虫基因编码13号染色体（k13）上的Kelch蛋白上的某些突变与青蒿素耐药性有关，位于第14号染色体上的血浆蛋白II/III（PM2/3）基因的多个拷贝已被证明与PPQ抗性有关。本研究对2010-2014年在中缅边境地区应用DHA-PPQ治疗单纯恶性疟原虫的疗效进行评价。在DHA-PPQ疗效评估前收集病人的滤纸干血滴样本，通过采集当地医院被动检测发现的病例的血样，同时扩增k13和pm2。采用毛细管测序法对k13基因多态性进行基因分型，采用相对定量实时聚合酶链反应对pm2拷贝数进行定量。治疗结果按世界卫生组织方案进行评估。采用线性回归模型估计第3天阳性率与k13突变之间的关系以及pm2拷贝数变异与k13突变之间的关系。结果发现DHA-PPQ治疗云南省单纯恶性疟原虫感染有效，治愈率>95%。在268例恶性疟样本中发现12个非同义突变，发生率为44.0%，优势突变为F446I，突变率为32.8%。仅有一例样本检测到存在pm2多拷贝。因此，本研究通过临床研究和分子标记调查均未发现PPQ耐药的证据，DHA-PPQ对中缅边境抗青蒿素疟疾地区单纯恶性疟原虫感染仍有疗效，采用抗性分子标记持续监测疟原虫种群，对于跟踪该地区抗药性的出现和传播具有重要意义。