Laboratory Evaluation of a Basic Recombinase Polymerase Amplification (RPA) Assay for Early Detection of Schistosoma japonicum

早期检测日本血吸虫感染中间宿主及终宿主对于及时发现血吸虫病例及疾病监测至关重要，尤其在血吸虫病低度流行情况下。重组酶聚合酶扩增（RPA）是一种新型的等温扩增技术，其相对传统的DNA扩增方法如聚合酶链式反应（PCR），不仅具有高敏感性及特异性，且因其不需要热循环设备，操作更简便、快速等特点，具备在资源匮乏的血吸虫病流行区现场应用的优势。本课题组前期以日本血吸虫28SrRNA基因片段为靶标，建立了高敏感及高特异性的日本血吸虫基础RPA检测体系。 在此基础上，本研究在实验室建立了日本血吸虫感染钉螺和小鼠模型，通过与传统寄生虫检测技术和PCR方法进行比较，初步探索和评价了基础RPA检测体系早期发现血吸虫感染钉螺及感染小鼠的潜在能力。本研究对实验室人工感染后1天、3天、5天、1周至11周共14个时间点收集的140只钉螺，采用解剖镜检、PCR和RPA三种方法进行平行检测，结果发现解剖镜检、PCR和RPA方法检出的钉螺的总感染率分别为9.29%（13/140）、32.14%（45/140）和51.43%（72/140），其差异显著（χ2=58.31，P<0.001）。值得一提的是，PCR和RPA方法检测感染6周内钉螺样本的感染率分别为34.44%（31/90）和53.33%（48/90），然而解剖镜检法在感染6周内未检出阳性样本。此外，对梯度感染了5条、10条或20条尾蚴的小鼠感染后不同时间点粪便DNA及血清DNA样本检测发现，RPA可在20条尾蚴感染后第4周的小鼠粪便DNA及第3天血清DNA中检出阳性结果。本研究结果提示，相对传统方法及PCR方法，本课题组建立的基础RPA检测体系在日本血吸虫中间宿主和终宿主感染早期发现方面更具潜力。

本文第一作者为中国CDC寄生虫病所邓王平副研究员，已毕业研究生王盛琳为共同第一作者，中国CDC寄生虫病所许静研究员为通讯作者。该文于2022年3月4日在线发表于《Pathogens》杂志，全文链接：https://doi.org/10.3390/pathogens11030319

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