环卵沉淀试验（COPT）

一、原理    COPT是利用抗原－抗体反应检测血清中抗体的一种免疫试验。当成熟虫卵内毛蚴的分泌、排泄物质与血吸虫病人血清中相应抗体结合后，在虫卵周围形成特异性沉淀物，即为阳性反应。在非血吸虫病人血清中因无相应抗体的存在，故在虫卵周围不出现特异的沉淀物，即为阴性反应。沉淀物的形成取决于虫卵内分泌、排泄物质透过卵壳微孔的速度和

透过部位的面积。
二、操作方法    先用融化的石蜡在洁净的载玻片两端分别划两条相距20mm的蜡线，在蜡线之间加受检者血清50～80μl，然后用针头挑取干卵约100～150个，加入血清中，混匀，覆以22×22盖玻片，四周用石蜡密封后，置于37℃温箱中，经48～72h后，用低倍（80～100×）显微镜观查反应结果，疑似者应在高倍（400×）显微镜下，加以鉴别。

三、结果判断及标准  典型的阳性反应为泡状、指状或细长卷曲的带状沉淀物，边缘较整齐，有明显的折光，泡状沉淀物须大于10μm（约相当2个红细胞大小）以上，才能定为阳性反应。阳性反应的标本片，应观察100个成熟虫卵，计算其环

沉率；阴性者必须看完全片；全片虫卵少于60个者要重做。
    阴性反应    虫卵周围光滑，无沉淀物，或有小于10μm的泡状沉淀物。
    阳性反应    反应强度和环沉率：
    “＋”  虫卵周围出现泡状、指状沉淀物的面积，小于虫卵外围面积的1／4；细长卷曲的带状沉淀物小于虫卵的长径。
    “＋＋”    虫卵周围出现泡状、指状沉淀物的面积，大于虫卵外周面积的1／4；细长卷曲的带状沉淀物相当于或超过虫卵的长径。

    “＋＋＋”  虫卵周围出现泡状、指状沉淀物的面积，大于虫卵外周面积的1／2；细长卷曲的带状沉淀物相当于或超过虫

卵长径的2倍。
环沉率＝（阳性虫卵数／全片观察虫卵数）×100
    目前在基本消灭血吸虫病地区常以≥3%环沉率作为临床治疗血吸虫病患者的参考指标。
四、注意事项   
1.  划蜡线应待石蜡加热至开始冒烟时，用棉签蘸腊一次划成，以保持蜡线厚薄均匀，蜡线不宜过厚，线间距离不宜小于20mm。
2.  在实验血清中调入干卵数不能过多，以100～150个为宜；将干卵挑入血清后，必须使虫卵均匀分散，切勿成团块。
3.  宜用22×22盖玻片；通常采用重复一次蜡封盖玻片，以免密封不严，影响反应结果。
4.  检测基本消灭血吸虫病地区的人群时，虫卵孵育不宜低于72h，否则会影响检出率。
5.  应准确地掌握COPT的阳性反应标准。阳性反应的主要特征，即在卵周的沉淀物呈现明显的折光，必须识别这一反应特点。
6.  观察反应结果时，应先用低倍镜观察，见有疑似者，再用高倍镜识别。
7.  要善于区别粘附于卵周的红细胞、组织碎块及从卵壳破裂处渗出的毛蚴组织等。通常用高倍镜观察时，易于识别这些物质。
8.  观察反应结果时，计数100个成熟虫卵的反应，并计数环沉率。凡不成熟卵或破壳卵，不应计数。
9.  观察结果时，不宜过快，应仔细地识别每个成熟虫卵的反应情况。移动标本片时，要有规律性（如自左向右），以免漏

检阳性虫卵。
10.  检查完毕的标本片，可用3％来沙尔浸泡1～2天，待盖片脱开后，分别清洗、拭干备用。

五、应用范围    血吸虫病的免疫学诊断。